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Elektrophorese, Länge von DNA Fragmenten

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Estriktionsenzyme sind Enzyme, die in der Lage sind, DNA Moleküle auf der Grundlage der Basensequenz der DNA Moleküle an sehr spezifischen Stellen aufzuspalten bzw. zu trennen.

Ihre Entdeckung und Isolierung in der zweiten Hälfte des 20. Jahrhunderts lieferte Wissenschaftlern ein enorm wertvolles Werkzeug und erweiterte sehr schnell den Wissenschaftsbereich der Molekularbiologie.

Agarose-Elektrophorese ist eine Technik zur Trennung der Teile einer DNA, die sich aus der Anwendung von Restriktionsenzymen ergeben.

In dieser Aufgabe werden Studenten Agarose-Elektrophorese an drei DNA Proben durchführen, die bereits mit Restriktionsenzymen behandelt worden sind.

Eine Probe wurde mit dem Enzym HindIII geschnitten, eine mit dem Enzym EcoRI und eine mit beiden Enzymen.
Das resultierende Muster an DNA Bändern im Agarose-Gel zeigt, dass jedes Enzym auf unterschiedliche Weise auf die DNA wirkt.

Die Studenten lernen nicht nur Kenntnisse über den Prozess der DNA Elektrophorese, sondern auch mit diesem Projekt verbundene Techniken wie zum Beispiel die Vorbereitung von Agarose-Gel, das Einbringen der DNA Proben in das Agarose-Gel und das Einfärben des Gels, um die DNA Bänder zu visualisieren.

Sie lernen darüber hinaus, wie nach der Untersuchung der Ergebnisse die Größe der unbekannten DNA Fragmente bestimmt werden kann.

Der Satz beinhaltet speziell behandelte DNA Proben, die keine Kühlung oder Einfrieren erfordern, vorbereitetes Agarose-Gel, das einfach in einem heißem Wasserbad oder einer Mikrowelle geschmolzen werden kann, TBE Elektrophorese-Puffer und DNA Farbstoff.

Es ist ausreichend DNA für 10 Gel-Experimente vorhanden.

Der Satz enthält:
200 ml vorbereitetes Agarose-Gel, 0,8% Lösung
500 ml Tris Borate ETA Puffer, 5X
60 ml DNA Farbstoff, 20X
100 µl Lambda DNA/EcoRI Digest mit Probenfarbstoff
100 µl Lambda DNA/HindIII Digest mit Probenfarbstoff
100 µl Lambda DNA/EcoRI,HindIII Digest mit Probenfarbstoff

Erforderlich, aber nicht im Lieferung enthalten sind: Elektrophorese-Kammern, Stromversorgung und Mikropipetten mit einer Messgenauigkeit von 10 µl.

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